詞條
詞條說明
柱溫是高效液相色譜儀的重要參數(shù),精確控制柱溫可提高保留時(shí)間的重現(xiàn)性。一般情況下,較高柱溫能增加樣品在流動(dòng)相中的溶解度,縮短分析時(shí)間。升高柱溫能增加柱效,提高分離效率。通常柱溫升高6℃,組分保留時(shí)間減少約30%。分析高分子化合物或粘度大的樣品時(shí),柱溫必須**室溫。分析具有生物活性的生物分子時(shí),柱溫應(yīng)**室溫。高效液相色譜儀常用柱溫范圍一般為室溫至60℃。
建立高效液相色譜儀分析方法的步驟包括選擇合適的分離方式與分析方法、分析條件的優(yōu)化、定性與定量分析等。 一、選擇合適的分離方式: 根據(jù)樣品來源、濃度范圍、組分特性、結(jié)構(gòu)、分子量和溶解性等特性,選擇適用于樣品分析的HPLC分離方式。 二、選擇合適的分析方法: 選擇合適的色譜柱、流動(dòng)相、檢測器和樣品預(yù)處理方法等。 三、分析條件的優(yōu)化: 對流動(dòng)相種類、配比、梯度、溫度、流速、檢測波長和進(jìn)樣量等分析條件進(jìn)行
由色譜儀基本分離方程R =(n2/1/4)×[(α-1)/α]×[k/(k + 1)]可知,改變k、n或α,可改變分離度R。分離度R控制的一般原則如下: 一、若開始k很小,要增大R,則首先應(yīng)將k調(diào)整至1<k<10范圍。 調(diào)節(jié)溶劑強(qiáng)度可改變k。 1、正相色譜: 溶劑極性大,溶劑強(qiáng)度大,洗脫能力強(qiáng),k小。 2、反相色譜: 溶劑極性大,溶劑強(qiáng)度小,洗脫能力弱,k大。 二、若開始k已在1<k<10范圍,但
? 生物分離的基本原理是指根據(jù)生物體(包括原子、分子、分子復(fù)合物、分子聚合體和細(xì)胞等)中各種物質(zhì)之間物理、化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)的差別,利用能夠識別這些差別的分離介質(zhì)和能夠擴(kuò)大這些差別的分離設(shè)備,實(shí)現(xiàn)各種物質(zhì)的分離。 1、利用物質(zhì)物理學(xué)性質(zhì)的不同進(jìn)行分離: (1)力學(xué)性質(zhì): 利用物質(zhì)的密度、大小和形狀等力學(xué)性質(zhì)的不同,可進(jìn)行顆粒(如細(xì)胞)的重力沉降,分子或顆粒的離心機(jī)分離和膜分離。 (2)熱力
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