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熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET) 是兩個(gè)發(fā)色團(tuán)(供體分子和受體分子)之間依賴于距離的能量轉(zhuǎn)移。當(dāng)靠近時(shí),電子激發(fā)的供體生色團(tuán)可以通過分子內(nèi)長程偶-偶耦合相互作用以非輻射方式將能量轉(zhuǎn)移到受體生色團(tuán)。因此,能量的轉(zhuǎn)移淬滅了供體的熒光強(qiáng)度并減少了其激發(fā)態(tài)壽命,同時(shí)增加了受體生色團(tuán)的排放系數(shù)。由于 FRET 的效率取決于分子間分離的反六次方,因此它是一種有利的技術(shù),可用于研究產(chǎn)生分子接近度變化的各種生物現(xiàn)象
一.碘化丙啶簡介?碘化丙啶(Propidium iodide)是一個(gè)小分子芳香化合物,通常在研究和開發(fā)中作為熒光核酸結(jié)合染料。PI通常用于區(qū)分活細(xì)胞與凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞,因?yàn)樗梢宰杂蓾B透死亡或損傷細(xì)胞膜,而不能進(jìn)入正?;罴?xì)胞。碘化丙啶能染色核酸,如DNA和RNA,因此可用作流式細(xì)胞儀、原位雜交和組織化學(xué)應(yīng)用中細(xì)胞膜完整性的指示劑。?在樣品中加入碘化丙啶后,細(xì)胞膜性或可逆性損傷
1.活性氧ROS Brite 570概述?活性氧(ROS)是以化學(xué)方法反應(yīng)的包含活性氧原子的化合物。例如:氧化物、含有羥基自由基、單線態(tài)氧和過氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性,因?yàn)榇嬖谖磁鋵Φ膬r(jià)電子層單電子。 ROS是生物氧代謝自然形成的副產(chǎn)物,它在細(xì)胞信號傳遞和體內(nèi)平衡方面扮演著重要角色。然而在一些環(huán)境情況下(如紫外線照射或者高溫環(huán)境下),ROS水平將大幅度增加。這可能導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)
百螢課堂之Annexin V-mFluor 570藍(lán)色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)方案
一.百螢 Annexin V-mFluor 570藍(lán)色標(biāo)記作用及原理Annexin V-mFluor 570藍(lán)色標(biāo)記探針是用于檢測細(xì)胞功能的探針,膜聯(lián)蛋白是鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白家族。 它們富含真核生物,屬于參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的普遍存在的細(xì)胞質(zhì)蛋白家族。 膜聯(lián)蛋白V的結(jié)合配偶體是磷脂酰絲氨酸(PS),其通常保持在細(xì)胞膜的內(nèi)葉(細(xì)胞質(zhì)側(cè))。 在細(xì)胞凋亡中,PS被轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外部小葉。 磷脂酰絲氨酸在細(xì)胞表面
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