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百螢課堂之活性氧Reactive Oxygen Species(ROS)
1.百螢活性氧(ROS)概述?活性氧(ROS)是具有化學(xué)活性的含氧分子,是作為細(xì)胞代謝的副產(chǎn)品自然產(chǎn)生的。在生理條件下,ROS水平受到仔細(xì)調(diào)節(jié),它們在正常細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期、基因表達(dá)和體內(nèi)平衡中充當(dāng)信使。當(dāng)過量產(chǎn)生時,ROS有可能導(dǎo)致許多有害事件。在高濃度下,ROS會在細(xì)胞中誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,從而導(dǎo)致細(xì)胞大分子(如核酸、膜脂和細(xì)胞蛋白質(zhì))的后續(xù)損傷。這些生物分子的氧化損傷可引發(fā)細(xì)胞凋亡,
百螢 Helixyte? iFluor 350 核酸標(biāo)記染料?實驗方案
一.百螢 HelixyteTM??iFluor 350概述?Helixyte? iFluor 350 核酸標(biāo)記染料是我們 Helixyte 核酸標(biāo)記和綴合技術(shù)的關(guān)鍵成員之一。由于核酸分子中缺乏反應(yīng)性部分,標(biāo)簽/半抗原與核酸的標(biāo)記/綴合一直非常具有挑戰(zhàn)性。胸腺嘧啶和鳥苷經(jīng)常被探索用于核酸綴合,例如光交聯(lián)(通過補(bǔ)骨脂素與胸腺嘧啶)或鳥苷的化/尤氏標(biāo)記。然而,這些現(xiàn)有的綴合
鬼筆環(huán)肽是鬼筆毒素家族的主要代表,是一種雙環(huán)七肽,是從有毒的死亡帽蘑菇傘形毒蕈中分離出來的。它對F-肌動蛋白亞基之間的凹槽具有很高的親和力。一旦與F-肌動蛋白結(jié)合,鬼筆環(huán)肽就會使單體和長絲的平衡向長絲位置移動,并抑制ATP水解。相互作用通過防止亞基解離來穩(wěn)定肌動蛋白絲,并通過降低臨界濃度促進(jìn)肌動蛋白聚合。結(jié)果,這些特性使得鬼筆環(huán)肽衍生物成為可視化F-肌動蛋白和細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)的有用染色劑。本周百螢主要
注1:整個綴合過程可以在?內(nèi)完成。但是,綴合前對APC?的純化可能需要24-48小時。除了下面列出的材料外,您還需要濃度至少為2mg/ml的抗體溶液。請您在進(jìn)行APC抗體綴合實驗之前熟悉如何使用脫鹽柱以及如何吸光度光譜。注?2?:?SMCC-APC綴合物非常穩(wěn)定(在“交換緩沖液”中,在4℃下至少可以穩(wěn)定幾個月)。因此,??如果您
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